Набор реагентов для проведения полногеномной амплификации «WGA Сlassic»

В набор включены все необходимые реагенты:
1.      Лизирующий буфер
2.      Р-реагент
3.      Нейтрализующий буфер
4.      ПЦР-буфер
5.      Полимераза
6.      Буфер для разбавления

Скачать краткую инструкцию "WGA Classic"

Cкачать полную инструкцию "WGA Classic"

Проведение процедуры полногеномной амплификации

Важно: все процедуры должны проводиться в условиях максимальной стерильности и отсутствия контаминации, так как данная система имеет высокий уровень чувствительности. Все операции необходимо проводить в особо чистом изолированном ламинарном боксе. Перед началом процедуры следует провести тщательную деконтаминацию рабочего места. Процедуры должны проводиться в одноразовых средствах индивидуальной защиты.
Лизис
1.   Подготовить мастер-микс для лизиса на необходимое количество образцов:

1.   Тщательно перемешать мастер-микс.
2.   В пробирки с образцами объемом 0,2 мл аккуратно внести на стенку 6 мкл мастер-микса. Не вортексировать. Объем образца не должен превышать 5 мкл.
3.   Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
4.   Поместить пробирки в амплификатор с предварительно установленной программой для лизиса после выхода прибора в рабочее состояние I этапа:

1.   После установки пробирок в амплификатор необходимо пропустить I этап.
Нейтрализация
1.   Достать пробирки из амплификатора. Добавить к смеси 3,5 мкл нейтрализующего буфера. Не вортексировать.
2.   Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
Амплификация
1.   Предварительно установить программу для амплификации:

Важно: установить температуру крышки амплификатора 50°С.
Длительность II этапа подбирается в зависимости от необходимого количества продукта амплификации:

2.Подготовить мастер-микс для амплификации на необходимое количество образцов:

3. Перемешать мастер-микс плавным переворачиванием пробирки, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
4.   Внести по 35,5 мкл мастер-микса к образцам.
5.   Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
6.   Поместить пробирки в амплификатор с предварительно установленной программой и пропустить I этап.
Полученные продукты амплификации можно применять в дальнейших исследованиях без дополнительной обработки.

Набор реагентов «WGA Classic» необходимо хранить при температуре -20℃, срок хранения составляет 12 месяцев.