Набор реагентов для измерения концентрации ДНК на флуориметре Qubit "Spectra Q HS Ready", Raissol

Проведение процедуры измерения концентрации двухцепочечной ДНК

Примечание: Spectra Q HS Ready buffer, Standard 1 и Standard 2 предварительно должны быть нагреты до комнатной температуры. Standard 2 допускается нагревать при 60℃ в течение 10-15 минут.

Приготовить стандарты в тонкостенных прозрачных пробирках: Standard 1 – 10 мкл первого стандарта разводятся в 190 мкл буфера Spectra Q HS Ready buffer; Standard 2 – 10 мкл второго стандарта разводятся в 190 мкл буфера Spectra Q HS Ready buffer.

Подготовить образцы: в отдельную тонкостенную прозрачную пробирку вносится 200-Vобр мкл буфера Spectra Q HS Ready buffer и Vобр мкл анализируемого образца (варьируется от 1 до 10 мкл). Например, при измерении пробы Vобр=2 мкл в пробирку вносится 200-2=198 мкл буфера Spectra Q HS Ready buffer и 2 мкл измеряемой пробы.

Все образцы и стандарты перемешать на вортексе. Сбросить капли со стенок с помощью кратковременного центрифугирования.

Опционально: инкубировать получившиеся образцы в течение 10-15 минут при комнатной температуре в недоступном для света месте для достижения лучшего связывания.

На флуориметре Qubit выбрать метод «dsDNA».

В открывшемся меню выбрать программу «High Sensitivity».

Перед измерением откалибровать прибор, нажав кнопку «Read standards». Поочередно измерить сначала 1-й стандарт, затем 2-й.

После замера обоих стандартов нажать кнопку «Run samples». Установить объем образца в зависимости от того, какой объем образца вносился в пробирку.

Последовательно измерить концентрации образцов.

Важно! Реагенты набора «Spectra Q HS Ready» проявляют сродство к молекулам РНК в 100 раз ниже, чем к ДНК, однако большие примеси РНК могут влиять на количественное определение ДНК.

вернуться в каталог товаров