Набор для выделения нуклеиновых кислот из молока "Meta Milk Maxi"

Raissol

10000,00

р.

Meta Milk - набор, входящий в линейку продукции Meta от Raissol®, разработанный специально для выделения метагеномной ДНК из образцов молока большого объема (до 3000мкл), не требующий дорогостоящего оборудования и не включающий в себя сложнооперационные процедуры. Выделение одного образца занимает не более 80 минут, а сорбция на магнитных частицах позволяет уменьшить потери НК в сравнении с колоночными методами сорбции. Многокомпонентный лизирующий раствор позволяет выделить ДНК как грамм+ так и грамм- бактерий, а также дрожжей и дрожжеподобных грибков. Выделенные нуклеиновые кислоты подходят для любых дальнейших приложений, включая ПЦР, рестрикцию, подготовку полногеномных библиотек и пр.

Тип образца: Молоко

Состав набора

Инструкция по использованию

Условия хранения

Необходимые материалы и оборудование

Состав набора

В набор включены все необходимые реагенты для выделения ДНК:
1.    Лизирующий буфер – на основе хаотропных агентов и вспомогательных компонентов для оптимального лизиса;
2.    Связывающий буфер – для повышения сорбции НК на магнитных частицах;
3.    Ресуспендирующий буфер – для разрушения конгломерата частиц;
4.    Промывочный буфер 1 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
5.    Промывочный буфер 2 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
6.    Элюирующий буфер – для элюции и хранения НК, pH=8,9;
7.    Протеиназа К – для более быстрого и полного лизиса;
8.    Магнитные частицы – для сорбции НК.

Инструкция по использованию

Проведение процедуры выделения ДНК

Лизис
1.    В пробирки объемом 15 мл поместить 3 мл исследуемых проб молока.
2.    Добавить к образцам 1 мл лизирующего буфера и 10 мкл Протеиназы К.
3.    Перемешать пробирки с помощью переворачивания.
4.    Инкубировать пробирки на водяной бане при температуре 56-60℃ в течение 40 минут, периодически перемешивая.
Сорбция НК
1.    Добавить в пробирки 8 мл связывающего буфера и 50 мкл магнитных частиц, перемешать.
2.    Инкубировать пробирки при комнатной температуре в течение 20-30 минут, перемешивая каждые 5 минут, либо установить на вращающийся ротор с минимальной скоростью.
3.    Центрифугировать пробирки в течение 5 минут при макс. об/мин, после чего удалить супернатант.
Ресуспендирование
1.    Добавить к каждому осадку 500 мкл ресуспендирующего буфера и разрушить конгломерат частиц с помощью пипетирования.
2.    Перенести суспензию в новые пробирки объемом 1,5-2 мл.
3.    Инкубировать пробирки на магнитном штативе в течение 5 минут.
4.    Аккуратно, не задевая осадок частиц, удалить супернатант.
Промывка НК
1.    Добавить в пробирки 500 мкл промывочного буфера 1.
2.    Интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
3.    Инкубировать пробирки на магнитном штативе в течение 3 минут, после чего аккуратно, не задевая осадок частиц, удалить супернатант.
4.    Повторить пункты 1-3.
5.    Добавить в пробирки 500 мкл промывочного буфера 2.
6.    Повторить пункты 2-3.
7.    Высушить образцы с открытыми крышками в термостате при 56-60℃ в течение 5-10 минут до полного испарения промывочного раствора.
Элюция НК
1.    Добавить в пробирки 40-60 мкл элюирующего буфера.
2.    Интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
3.    Инкубировать в термостате при температуре 56-60℃ в течение 5 минут, периодически встряхивая.
4.    Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
5.    Инкубировать пробирки на магнитном штативе в течение 3-5 минут.
6.    Аккуратно, не задевая частицы, перенести элюат в новые пробирки.
Опционально: рекомендуется провести дополнительное центрифугирование элюата на максимальной скорости для удаления остаточного количества магнитных частиц.
Полученные растворы нуклеиновых кислот могут храниться до 7 дней при температуре от +2℃ до +4℃ и до двух лет при температуре -20℃. По соотношению показателей поглощения на А260/А280 чистота полученного раствора ДНК соответствует ≥1,7.

Скачать краткую инструкцию "MetaMilkMaxi" (pdf)

Скачать полную инструкцию "MetaMilkMaxi" (pdf)

вернуться в каталог товаров

Условия хранения

Буферы набора «Meta Milk Maxi» могут храниться при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев с даты выпуска изготовителя. В случае наличия осадка при минимальных температурах хранения растворы следует нагреть до комнатной температуры.
Магнитные частицы могут храниться при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев с даты выпуска изготовителя. Перед применением суспензию частиц необходимо тщательно взбалтывать до однородного состояния.
Фермент Протеиназа К необходимо хранить при -20℃, срок хранения составляет 12 месяцев. Допускается кратковременное повышение температуры хранения (транспортировки) фермента Протеиназа К от +4℃ до +25℃ не более 5 суток.

Необходимые материалы и оборудование

Пробирки типа фалькон объемом 15 мл;
Штатив для пробирок типа фалькон;
Водяная баня с возможностью поддержания температурного режима в диапазоне 55-65ºС;
Центрифуга для пробирок типа фалькон объемом 15 мл;
Микроцентрифужные пробирки объемом 1,5-2 мл;
Магнитный штатив для микроцентрифужных пробирок объемом 1,5-2 мл;
Автоматические дозаторы переменного объема на 2-20 мкл, 20-200 мкл, 100-1000 мкл и соответствующие одноразовые наконечники;
Вортекс;
Твердотельный термостат с возможностью поддержания температурного режима в диапазоне 25-80ºС для пробирок объемом 1,5-2 мл;
Скоростная микроцентрифуга для пробирок объемом 1,5-2 мл до 13 тыс. об/мин.

Смотрите также