Набор реагентов для измерения концентрации ДНК на флуориметре Qubit «Spectra Q BR Plus» Raissol

В набор включены все необходимые реагенты для измерения концентрации ДНК:
1.      Spectra Q BR dye – интеркалятор;
2.      Spectra Q BR buffer – буферный раствор;
3.      Standard 1 – калибратор;
4.      Standard 2 – калибратор;
5.      Пробирки – тонкостенные полипропиленовые оптически прозрачные объемом 0,5 мл.

Проведение процедуры измерения концентрации двухцепочечной ДНК

1.     Приготовить мастер-микс на необходимое количество реакций из расчета:
Spectra Q BR dye - 1мкл на 1 реакцию
Spectra Q BR buffer - 199 мкл на 1 реакцию
2.     Приготовить стандарты в тонкостенных прозрачных пробирках: Standard 1 – 10 мкл первого стандарта разводятся в 190 мкл мастер-микса; Standard 2 – 10 мкл второго стандарта разводятся в 190 мкл мастер-микса.
3.     Подготовить образцы: в отдельную тонкостенную прозрачную пробирку вносится 200-Vобр мкл мастер-микса и Vобр мкл анализируемого образца (варьируется от 1 до 10 мкл). Например, при измерении пробы Vобр=2 мкл в пробирку вносится 200-2=198 мкл мастер-микса и 2 мкл измеряемой пробы.
4.     Все образцы и стандарты перемешать на вортексе. Сбросить капли со стенок с помощью кратковременного центрифугирования.
5.     На флуориметре Qubit выбрать методы «dsDNA».
6.     В открывшемся меню выбрать программу «Broad Range».
7.     Пред измерением откалибровать прибор, нажав кнопку «Read standards». Поочередно измерить сначала 1-й стандарт, затем 2-й.
8.     После замера обоих стандартов нажать кнопку «Run samples». Установить объем образца, в зависимости от того, какой объем образца вносился в пробирку.
9.     Последовательно измерить концентрации образцов.

Spectra Q BR buffer необходимо хранить при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев c даты выпуска изготовителя.
Standard 1 и Standard 2 набора «Spectra Q BR» должны храниться при температуре от +2℃ до +8℃ в течение 12 месяцев, не допуская замораживания. Допускается кратковременное повышение температуры хранения (транспортировки) от +4℃ до +25℃ не более 5 суток.
Интеркалятор Spectra Q BR dye необходимо хранить при комнатной температуре в недоступном для света месте в течение 12 месяцев. При долгосрочном хранении интеркалятор должен храниться при температуре от -20℃ до +4℃ в недоступном для света месте в течение 12 месяцев и более.

Флуориметр Qubit (ThermoFisher Scientific, США); микроцентрифужные пробирки объемом 1,5-2 мл; пробирки тонкостенные полипропиленовые оптически прозрачные объемом 0,5 мл (входят в комплект); штатив для микроцентрифужных пробирок объемом 1,5-2 мл; штатив для пробирок объемом 0,5 мл; автоматические дозаторы переменного объема на 0,5–10, 2-20 мкл, 20-200 мкл, 100-1000 мкл и соответствующие одноразовые наконечники; вортекс.