ОСНАЩЕНИЕ И УСЛУГИ ДЛЯ НАУЧНЫХ ЛАБОРАТОРИЙ
Telegram
ОСНАЩЕНИЕ И УСЛУГИ ДЛЯ НАУЧНЫХ ЛАБОРАТОРИЙ
+7 (495) 128-82-74
sales@sesana.ru
Пробники реагентов в подарок
Получить

Набор реагентов для выделения ДНК из цельной крови Blood M

Raissol
6000,00
р.
КУПИТЬ СЕЙЧАС
Метод выделения ДНК из цельной крови методом сорбции на магнитных частицах с применением буфера для удаления красных клеток крови позволяет получить высокие концентрации ДНК для последующих приложений без риска потери НК на этапах промывки, свойственного для классических методов спиртового осаждения НК. Не рекомендуется использовать многократно замороженную кровь ввиду повреждения целостности клеток и, как следствие, потери ДНК на этапе удаления красных клеток. Допустимое замораживание крови – 1 раз. Происходит снижение выхода ДНК на 30-40% при однократном замораживании крови. Для работы с многократно замороженной кровью рекомендуем использовать набор Raissol® Blood Q.

Тип образца: Кровь

Состав набора
Инструкция по использованию
Условия хранения
Необходимые материалы и оборудование

Состав набора

В набор включены все необходимые реагенты для выделения ДНК:
1.    RBC буфер – предназначен для удаления эритроцитов крови;
2.    Лизирующий буфер – на основе хаотропных агентов и вспомогательных компонентов для оптимального лизиса;
  1. Связывающий буфер – для сорбции НК на магнитных частицах;
  2. Промывочный буфер 1 – для промывки нуклеиновых кислот от клеточных метаболитов и солей;
5.    Промывочный буфер 2 – для промывки нуклеиновых кислот от клеточных метаболитов и солей;
6.    Элюирующий буфер – для элюции и хранения НК, pH=8,9;
7.    Протеиназа К – для более быстрого и полного лизиса;
8.    Магнитные частицы – для сорбции НК.

Инструкция по использованию

Проведение процедуры выделения ДНК

Лизис
  1. В пробирки объемом 1,5-2 мл поместить 300 мкл крови и добавить 900 мкл RBC буфера.
  2. Встряхнуть пробирки на вортексе.
  3. Инкубировать при комнатной температуре в течение 5-10 мин.
  4. Центрифугировать 1 мин при макс. об/мин (не менее 13 тыс. об/мин для настольных центрифуг), далее удалить супернатант.
  5. К полученному осадку клеток добавить 200 мкл лизирующего буфера и 20 мкл Протеиназы К, интенсивно встряхнуть на вортексе до полного разрушения конгломерата клеток.
  6. Инкубировать в термостате при 56-60℃ в течение 5 минут*, периодически встряхивая.
  7. Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
  8. Инкубировать при комнатной температуре в течение 5 минут.
Сорбция НК
  1. Добавить к смеси 400 мкл связывающего буфера и 80 мкл магнитных частиц.
  2. Интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
  3. Инкубировать при комнатной температуре в течение 5 минут*, периодически перемешивая пробирки.
  4. Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
  5. Инкубировать на магнитном штативе в течение 5 минут.
  6. Аккуратно, не задевая частицы, удалить супернатант.
Промывка НК
  1. Добавить в пробирки 700 мкл промывочного буфера 1.
  2. Интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования, инкубировать на магнитном штативе в течение 2 минут.
  3. Аккуратно, не задевая частицы, удалить супернатант.
  4. Добавить в пробирки 700 мкл промывочного буфера 2.
  5. Интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования, инкубировать на магнитном штативе в течение 2 минут.
  6. Аккуратно, не задевая частицы, удалить супернатант.
  7. Повторить пункты 4-6.
  8. Высушить образцы с открытыми крышками в термостате при 56-60℃ в течение 5 минут, либо при комнатной температуре в течение 10 минут до полного испарения промывочного раствора.
Элюция НК
  1. Добавить в пробирки 50-100 мкл элюирующего буфера.
  2. Интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
  3. Инкубировать в термостате при 56-60℃ в течение 10 минут, периодически перемешивая.
  4. Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
  5. Инкубировать на магнитном штативе в течение 2 минут.
6.    Перенести элюат в новые пробирки объемом 1,5-2 мл.
Опционально: рекомендуется провести дополнительное центрифугирование элюата на максимальной скорости для удаления остаточного количества магнитных частиц.
*Увеличение времени инкубации способствует повышению выхода НК на 10-30%
Полученные растворы нуклеиновых кислот могут храниться до 7 дней при температуре от +2℃ до +4℃ и до двух лет при температуре -20℃. По соотношению показателей поглощения на А260/А280 чистота полученного раствора ДНК соответствует ≥1,7.

Скачать краткую инструкцию "BloodM" (pdf)

Скачать полную инструкцию "BloodM" (pdf)

    

   

вернуться в каталог товаров

Условия хранения

Буферы набора «GM Blood M» могут храниться при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев с даты выпуска изготовителя. В случае наличия осадка при минимальных температурах хранения, растворы следует нагреть до комнатной температуры.
Магнитные частицы могут храниться при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев с даты выпуска изготовителя. Перед применением суспензию частиц необходимо тщательно взбалтывать до однородного состояния.
Фермент Протеиназа К необходимо хранить при -20℃, срок хранения составляет 12 месяцев. Допускается кратковременное повышение температуры хранения (транспортировки) фермента Протеиназа К от +4℃ до +25℃ не более 5 суток.

Необходимые материалы и оборудование

  1. Микроцентрифужные пробирки объемом 1,5-2 мл;
  2. Штатив для микроцентрифужных пробирок объемом 1,5-2 мл;
  3. Автоматические дозаторы переменного объема на 20-200 мкл, 100-1000 мкл и соответствующие одноразовые наконечники;
  4. Вортекс;
  5. Скоростная микроцентрифуга для пробирок объемом 1,5-2 мл до 13 тыс. об/мин;
  6. Твердотельный термостат с возможностью поддержания температурного режима в диапазоне 25-80ºС для пробирок объемом 1,5-2 мл;
  7. Магнитный штатив для микроцентрифужных пробирок объемом 1,5-2 мл.
Смотрите также