Пробники реагентов в подарок

Набор для выделения ДНК из ткани животных «Tissue М»

Raissol
5200,00
р.
Метод выделения ДНК из тканей животных методом сорбции на магнитных частицах позволяет получить высокие концентрации ДНК для последующих приложений без риска потери НК на этапах промывки, свойственного для классических методов спиртового осаждения НК.

Тип образца: Ткани

Состав набора
Инструкция по использованию
Условия хранения
Необходимые материалы и оборудование

Состав набора

В набор включены все необходимые реагенты для выделения ДНК:
1.    Лизирующий буфер 1 – на основе детергентов и вспомогательных компонентов для оптимального лизиса;
2.    Лизирующий буфер 2 – на основе хаотропных агентов и вспомогательных компонентов для оптимального лизиса;
3.    Связывающий буфер – для повышения сорбции НК на магнитных частицах;
4.    Промывочный буфер 1 – для промывки нуклеиновых кислот от клеточных метаболитов и солей;
5.    Промывочный буфер 2 – для промывки нуклеиновых кислот от клеточных метаболитов и солей;
6.    Элюирующий буфер – для элюции и хранения НК, pH=8,9;
7.    Протеиназа К – для более быстрого и полного лизиса;
8.    Магнитные частицы – для сорбции НК.

Инструкция по использованию

Проведение процедуры выделения ДНК

Лизис
1.    В пробирки объемом 1,5-2 мл поместить исследуемые образцы.
2.    В случае хранения образцов в физиологическом растворе центрифугировать образцы в течение 5 минут при 13 тыс. об/мин, после чего полностью удалить супернатант.
3.    Добавить к образцам 200 мкл лизирующего буфера 1, 30 мкл Протеиназы К, интенсивно перемешать на вортексе.
Опционально: возможно использование РНКазы А любого производителя в концентрациях, рекомендованных производителем.
4.    Инкубировать образцы в термостате при 56℃ в течение 2-5 часов, периодически встряхивая.
5.    Центрифугировать образцы в течение 5 минут при 13 тыс. об/мин., после чего перенести 200 мкл супернатанта в новые пробирки объемом 1,5-2 мл.
6.    Внести 200 мкл лизирующего буфера 2, перемешать пробирки на вортексе и сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
Сорбция НК
1.    Добавить к смеси 200 мкл связывающего буфера и 50 мкл магнитных частиц, интенсивно перемешать пробирки на вортексе.
2.    Инкубировать в течение 3-5 минут при комнатной температуре, периодически встряхивая.
3.    Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
4.    Установить пробирки на магнитный штатив и инкубировать в течение 3-5 минут.
5.    Аккуратно, не задевая осадок, удалить супернатант.
Промывка НК
1.    Добавить в пробирки 700 мкл промывочного буфера 1, интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
2.    Инкубировать на магнитном штативе в течение 1-2 минут.
3.    Аккуратно, не задевая частицы, удалить супернатант.
4.    Добавить в пробирки 700 мкл промывочного буфера 2, интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
5.    Инкубировать на магнитном штативе в течение 1-2 минут.
6.    Аккуратно, не задевая частицы, удалить супернатант.
7.    Повторить пункты 4-6.
8.    Высушить образцы с открытыми крышками в термостате при 56-60℃ или при комнатной температуре до полного испарения промывочного раствора.
Элюция НК
1.    Добавить в пробирки 50-100 мкл элюирующего буфера.
2.    Инкубировать в термостате при 56-60℃ в течение 5 минут, периодически перемешивая на вортексе.
3.    Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
4.    Инкубировать на магнитном штативе в течение 1-2 минут.
5.    Перенести элюат в новые пробирки объемом 1,5-2 мл.
Опционально: рекомендуется провести дополнительное центрифугирование элюата на максимальной скорости для удаления остаточного количества магнитных частиц.

Полученные растворы нуклеиновых кислот могут храниться до 7 дней при температуре от +2℃ до +4℃ и до двух лет при температуре -20℃. По соотношению показателей поглощения на А260/А280 чистота полученного раствора ДНК соответствуют ≥1,7.

Скачать краткую инструкцию "TissueM" (pdf)

Скачать полную инструкцию "TissueM" (pdf)

вернуться в каталог товаров

Условия хранения

Буферы набора «Tissue M» могут храниться при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев с даты выпуска изготовителя. В случае наличия осадка при минимальных температурах хранения растворы следует нагреть до комнатной температуры.
Магнитные частицы могут храниться при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев с даты выпуска изготовителя. Перед применением суспензию частиц необходимо тщательно взбалтывать до однородного состояния.
Фермент Протеиназа К необходимо хранить при -20℃, срок хранения составляет 12 месяцев. Допускается кратковременное повышение температуры хранения (транспортировки) фермента Протеиназа К от +4℃ до +25℃ не более 5 суток.

Необходимые материалы и оборудование

  1. Микроцентрифужные пробирки объемом 1,5-2 мл;
  2. Магнитный штатив для микроцентрифужных пробирок объемом 1,5-2 мл;
  3. Автоматические дозаторы переменного объема на 2-20 мкл, 20-200 мкл, 100-1000 мкл и соответствующие одноразовые наконечники;
  4. Вортекс;
  5. Твердотельный термостат с возможностью поддержания температурного режима в диапазоне 25-80ºС для пробирок объемом 1,5-2 мл;
  6. Скоростная микроцентрифуга для пробирок объемом 1,5-2 мл до 13 тыс. об/мин.
Смотрите также