ОСНАЩЕНИЕ И УСЛУГИ ДЛЯ НАУЧНЫХ ЛАБОРАТОРИЙ
Получите пробники реагентов бесплатно
От компании "Сесана"
Отправляя заявку, вы автоматически соглашаетесь на условия политики обработки персональных данных.
Набор реагентов для выделения метагеномной ДНК из проб почвы "Meta Soil"
Raissol
16500,00
р.
Meta Soil – набор, входящий в линейку продукции Meta от Raissol®, разработанный специально для выделения метагеномной ДНК из образцов почвы, не требующий дорогостоящего оборудования и не включающий в себя сложнооперационные процедуры. Выделение одного образца занимает не более 80 минут, что в разы превосходит классические методы выделения, а сорбция на магнитных частицах позволяет уменьшить потери НК в сравнении с колоночными методами сорбции. Многокомпонентный лизирующий раствор позволяет выделить ДНК как грамм+ так и грамм- бактерий, включая стадию спор, а также дрожжевые клетки. Выделенные нуклеиновые кислоты подходят для любых дальнейших приложений, включая ПЦР, рестрикцию, подготовку полногеномных библиотек и пр.
Тип образца: Почва
В набор включены все необходимые реагенты для выделения ДНК:
1. Лизирующий буфер – на основе хаотропных агентов и вспомогательных компонентов для оптимального лизиса;
2. Связывающий буфер – для повышения сорбции НК на магнитных частицах;
3. Промывочный буфер 1 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
4. Промывочный буфер 2 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
5. Промывочный буфер 3 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
6. Промывочный буфер 4 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
7. Элюирующий буфер – для элюции и хранения НК, pH=8,9;
8. Протеиназа К – для более быстрого и полного лизиса;
9. Магнитные частицы – для сорбции НК.
1. Лизирующий буфер – на основе хаотропных агентов и вспомогательных компонентов для оптимального лизиса;
2. Связывающий буфер – для повышения сорбции НК на магнитных частицах;
3. Промывочный буфер 1 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
4. Промывочный буфер 2 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
5. Промывочный буфер 3 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
6. Промывочный буфер 4 – для промывки нуклеиновых кислот от органических примесей и солей;
7. Элюирующий буфер – для элюции и хранения НК, pH=8,9;
8. Протеиназа К – для более быстрого и полного лизиса;
9. Магнитные частицы – для сорбции НК.
Проведение процедуры выделения метагеномной ДНК
Лизис1. В пробирки объемом 1,5-2 мл поместить 100 мг исследуемых проб почвы.
2. К каждой навеске добавить 400 мкл деионизированной воды, исключая жидкие почвы (в т.ч. ил).
3. Добавить к образцам 400 мкл лизирующего буфера и 20 мкл Протеиназы К.
4. Интенсивно перемешать пробирки на вортексе.
5. Инкубировать пробирки в термостате при температуре 56℃ в течение 1-2 часов, периодически перемешивая.
6. Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
7. Поместить пробирки на лед или в холодный штатив и инкубировать в течение 3 минут. В случае отсутствия охладительных элементов инкубировать при комнатной температуре в течение 10 мин до полного остывания смеси.
Сорбция НК
1. Добавить к смеси 350 мкл связывающего буфера.
2. Интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
3. Инкубировать при комнатной температуре в течение 5 минут.
4. Центрифугировать пробирки в течение 5 минут при макс. об/мин.
5. Аккуратно, не задевая осадок, перенести супернатант в новые пробирки.
6. Повторить пункты 4-5.
7. Добавить в пробирки 50 мкл магнитных частиц, интенсивно перемешать пробирки на вортексе.
Рекомендация: добавить 240 мкл изопропанола для повышения сорбции деградированной ДНК.
8. Инкубировать при комнатной температуре в течение 5 минут, периодически перемешивая.
9. Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
10. Инкубировать на магнитном штативе в течение 5 минут.
11. Аккуратно, не задевая осадок частиц, удалить супернатант.
Промывка НК
1. Добавить в пробирки 500 мкл промывочного буфера 1.
2. Интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
3. Инкубировать пробирки на магнитном штативе в течение 2 минут. Аккуратно, не задевая осадок частиц, удалить супернатант.
4. Добавить в пробирки 500 мкл промывочного буфера 2.
5. Повторить пункты 2-3.
6. Добавить в пробирки 500 мкл промывочного буфера 3.
7. Интенсивно перемешать пробирки на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
8. Инкубировать пробирки на магнитном штативе в течение 2 минут. Аккуратно, не задевая осадок частиц, удалить супернатант.
9. Повторить пункты 6-8.
10. Добавить в пробирки 500 мкл промывочного буфера 4.
11. Повторить пункты 7-8.
12. Высушить образцы с открытыми крышками в термостате при температуре 56-60℃ в течение 5-10 минут до полного испарения промывочного раствора.
Элюция НК
1. Добавить в пробирки 50-100 мкл элюирующего буфера.
2. Интенсивно перемешать на вортексе, сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
3. Инкубировать в термостате при температуре 56-60℃ в течение 10 минут, периодически перемешивая.
4. Сбросить капли с помощью кратковременного центрифугирования.
5. Инкубировать пробирки на магнитном штативе в течение 3-5 минут.
6. Аккуратно, не задевая частицы, перенести элюат в новые пробирки.
Скачать краткую инструкцию "MetaSoil" (pdf)
Скачать полную инструкцию "MetaSoil" (pdf)
Буферы набора «Meta Soil» могут храниться при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев с даты выпуска изготовителя. В случае наличия осадка при минимальных температурах хранения, растворы следует нагреть до комнатной температуры.
Магнитные частицы могут храниться при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев с даты выпуска изготовителя. Перед применением суспензию частиц необходимо тщательно взбалтывать до однородного состояния.
Фермент Протеиназа К необходимо хранить при -20℃, срок хранения составляет 12 месяцев. Допускается кратковременное повышение температуры хранения (транспортировки) фермента Протеиназа К от +4℃ до +25℃ не более 5 суток.
Магнитные частицы могут храниться при температуре от +4℃ до +25℃ в течение 12 месяцев с даты выпуска изготовителя. Перед применением суспензию частиц необходимо тщательно взбалтывать до однородного состояния.
Фермент Протеиназа К необходимо хранить при -20℃, срок хранения составляет 12 месяцев. Допускается кратковременное повышение температуры хранения (транспортировки) фермента Протеиназа К от +4℃ до +25℃ не более 5 суток.
- Микроцентрифужные пробирки объемом 1,5-2 мл;
- Магнитный штатив для микроцентрифужных пробирок объемом 1,5-2 мл;
- Штатив для микроцентрифужных пробирок объемом 1,5-2 мл;
- Автоматические дозаторы переменного объема на 20-200 мкл, 100-1000 мкл и соответствующие одноразовые наконечники;
- Вортекс;
- Твердотельный термостат с возможностью поддержания температурного режима в диапазоне 25-80ºС для пробирок объемом 1,5-2 мл;
- Скоростная микроцентрифуга для пробирок объемом 1,5-2 мл до 13 тыс. об/мин;
- Штатив-охладитель или ледогенератор.
Смотрите также
Реагенты и оборудование для генетических исследований
© 2023 ООО "Сесана". Политика конфиденциальности и обработки персональных данных соответствует требованиям ФЗ от 27 июля 2006 г. № 152-ФЗ «О персональных данных».
© 2023 ООО "Сесана". Политика конфиденциальности и обработки персональных данных соответствует требованиям ФЗ от 27 июля 2006 г. № 152-ФЗ «О персональных данных».